中文名称: EvaGreen
英文名称: EvaGreen
CAS No:
PS0973 EvaGreen 20× in water (psaitong)
包装规格:
1mL in glass bottle
产品描述:

一种新型的的双链DNA结合荧光染料,用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料结构上由两个单体染料分子通过一个弹性臂连接成一个二聚体,在没有DNA存在时,该结构呈无荧光环状结构,一旦有DNA出现,则恢复随机形态并与DNA结合发出强烈的绿色荧光。

优点:

1、高灵敏度:在推荐浓度下使用时可以获得比SYBR Green I 更强的PCR扩增信号。

2、PCR抑制性小,非常适合多重PCR及HRM分析。过量染料形成二聚体,而不游离,使得EvaGreen对PCR的抑制远小于SYBR Green I。因此,使用EvaGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。同时,EveGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBR Green I扩增信号。EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析(HRM)。

3、高稳定性:在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。

4、安全性好:细胞膜穿透性测试表明,EvaGreen几乎不能穿透细胞膜,安全性高。

5、兼容性:和SYBR Green I 光谱相似,使用不同品牌qPCR仪器时不许改变光谱元件设置,也无需改变操作步骤,qPCR完成后,无需加入其它核酸染料便能直接在凝胶成像系统下观察分析。

 

此外,EvaGreen是目前仅有的可以用于微滴式数字PCR系统的染料,在微流控PCR,恒温扩增,毛细管电泳,DNA定量以及细胞活力鉴定等领域也具有良好的表现。

操作步骤:PCR反应的配制(50uL体系)

试剂

用量

ddH2O

计算加水到终体积50uL

Taq polymerase buffer without magnesium

5uL

2mM dNTPs

5uL

50mM MgCl2

2.5uL

20 X EvaGreen

2.5uL

Taq DNA polymerase

5U

Each of primers

0.1-1 uM(终浓度)

注意:

1、请根据不同的仪器类型,不加入或加入合适浓度的参比染料ROX。该体系需根据所使用的Taq酶的不同进行适当优化;

2、根据实验用量于冰上向无菌离心管中依次加入水,Taq polymerase buffer, dNTPs, MgCl2, EveGreen, Taq polymerase, and primers等配制qPCR反应体系(1×Master mix);

3、将1×Master mix 适量分装至无菌PCR管中,并加入DNA (50 ng/反应);

4、按照仪器类型选择合适的扩增程序。

 

 

注意事项:qPCR时注意设置阳性和阴性对照;为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:
2-8°C
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参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):