产品简介:
本产品是从高度耐热菌Thermus aquaticus 中克隆其 DNA 聚合酶基因,原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热DNA聚合酶,SDS-PAGE显示为一条94kD 的蛋白条带。该酶除具有5’-3’DNA 聚合活性外,还具有少量的5’-3’DNA 外切活性,但不具有3’-5’DNA 外切活性(校读活性),适用于常规 PCR 扩增。M5 Taq DNA Polymerase 扩增得到的PCR 产物含有3’-A 碱基,可直接用于TA克隆。
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在 74℃、30 分钟内,摄入 10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)
适用范围
1.基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量 DNA 的检测。
2. 用于从复杂模板中如基因组等扩增 PCR 产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
所需试剂:
使用者仅需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在 74℃、30 分钟内,摄入 10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)
适用范围
1.基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量 DNA 的检测。
2. 用于从复杂模板中如基因组等扩增 PCR 产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
所需试剂:
使用者仅需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。
操作步骤:
操作示例: | 建议的PCR条件: | |||
按下表配制PCR反应体系(冰上操作): | 95°C | 3 min. | ||
Template DNA* | <1µg | 23-25 cycles of: | ||
10× Taq PCR Buffer | 2.5 μl | 94°C | 30 sec. | |
25 mM MgCl2 | 3 μl** | 55–56°C | 30 sec. | |
10mM dNTPs | 1 µl | 72°C | 30sec.-1min./1kb DNA | |
正向引物 (10 μM) | 1 µl | 72°C | 5 min. | |
反向引物 (10 μM) | 1 µl | 保持 4°C forever |
电泳结果检测:
取2μl反应液,添加上样缓冲液,电泳观察结果。
组分:
组分 | 规格 | 规格 | 规格 | 规格 |
Taq DNA Polymerase (5 U/µl) | 500U | 5×500ul | 10×500ul | Taq DNA Polymerase (5 U/µl) |
10x Taq PCR Buffer (Mg2+-free) | 1mL | 5×1mL | 10×1mL | 10x Taq PCR Buffer (Mg2+-free) |
25 mM MgCl2 | 200 μl | 5×200 μl | 10×200 μl | 25 mM MgCl2 |
10x Taq PCR Buffer (Mg2+-free) 成分:100 mM TrisCl (pH 8.3), 500 mM KCl |
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
保存条件:
-20℃
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )