简介:本产品专供PCR后跑PAGE电泳而开发的mix,包含高纯度Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR 反应及GC 含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的 3’端附有一个突出的"A" 碱基,纯化后可直接用于TA 载体克隆。本产品有含红色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE 琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA 片段相近。
组份:
组份 |
规格 |
规格 |
规格 |
规格 |
2× PAGE Taq PCR mix with Red Dye |
1ml |
5x1ml |
10x1ml |
100x1ml |
Nuclease-free ddH2O |
1ml |
5ml |
2x5ml |
20x5ml |
适用范围
1. 需要通过PAGE 胶电泳检测的PCR 反应。
2. 基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量 PCR 实验和微量 DNA 的检测。
3. 用于从复杂模板中如基因组等扩增 PCR 产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
所需试剂:使用者仅需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。
操作示例: 建议的PCR条件:
按下表配制PCR反应体系(冰上操作): |
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95°C |
3 min. |
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Template DNA* |
<1µg |
32-36 cycles of: |
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2× PAGE Taq PCR mix with Red Dye |
10 μl |
94°C |
25 sec. |
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Primer 1 (10 μM) |
0.5 µl |
55–64°C |
25 sec. |
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Primer 2 (10 μM) |
0.5 µl |
72°C |
1 min/1 kb DNA |
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Nuclease-free ddH2O 补足至 |
20 µl |
72°C |
5 min. |
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4°C |
forever |
<*模板量:10~1000 ng 基因组 DNA,1~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系>。
储存条件:长期保存,请置于-20˚C,有效期 24 个月。经常使用,可置于 4˚C 保存至少六个月。注:如保存温度长期低于-30 ˚C 或遇干冰急冻, 本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )