产品简介
|
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称 HE 染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色，细胞核内染色质的主要成分是DNA，在 DNA 的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法；自然氧化是指暴露于光和空气中，这个过程比较缓慢，约需 3～6 个月不等，但生成物染色能力可维持很长时间，Ehrlich 和 Delafield 苏木素就属于这种；Ehrlich 苏木素作为一种良好的核染色液，也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖，骨和软骨的染色也推荐使用 Ehrlich 苏木素染液。 Ehrlich 苏木素染液非常稳定，成熟后密封可保存 2 年，对核染色质染得很清晰细致，染色时间也稍长，约 15～20min，适用于教学和科研上的制片染色，用此染色液对冷冻切片染色则不理想。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。 |
组成：
|
产品名称 |
规格 |
规格 |
Storage |
|
Ehrlich苏木素染色液 |
100ml |
500ml |
RT |
自备材料：
|
1、盐酸乙醇分化液 |
|
2、蓝化液，如稀氨水、碳酸锂溶液等 |
|
3、系列乙醇 |
|
4、伊红染色液 |
|
5、4%多聚甲醛 |
染色原理：
|
1、细胞核染色原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色，细胞核内染色质的成分主要是 DNA，在 DNA 双螺旋结构中两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 |
|
2、细胞浆染色原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色，细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的 pH 值密切相关，当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。 |
|
3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在 HE 染色中常用 0.5－1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织与色素分离而退色，大多数组织经苏木素染色后，必须用盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 |
|
4、返蓝作用：分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用，另外用自来水(尤其是温水)浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。 |
操作步骤(仅供参考)：
|
(一)石蜡切片染色 |
|
1、切片脱蜡至水 |
|
①二甲苯或浸蜡脱蜡透明液(Leagene DZ2011)作用 2 次，每次 5～10min。 |
|
②(可选)无水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。 |
|
③95%的乙醇 3～5min |
|
④90%的乙醇 3～5min |
|
⑤80%的乙醇 3～5min |
|
⑥自来水或蒸馏水冲洗 1～3min |
|
2、染色 |
|
①Ehrlich 苏木素染色液染色 15～20min |
|
②自来水或蒸馏水冲洗 5～10s |
|
③(可选)盐酸乙醇分化 2～5s |
|
④自来水冲洗 20～30s |
|
⑤(可选)蓝化液返蓝 20～40s |
|
⑥自来水冲洗 30～60s |
|
⑦伊红染色液染色 3～5min |
|
⑧自来水冲洗 1～5s |
|
3、脱水、透明、封固 |
|
①80%乙醇 10～20s |
|
②90%乙醇 10～20s |
|
③95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。 |
|
④无水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。 |
|
⑤二甲苯或浸蜡脱蜡透明液(Leagene DZ2011)透明 3 次，每次 2～3min。 |
|
⑥中性树脂封片。 |
染色结果：
|
细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。 |
(二)细胞染色
|
1、4%多聚甲醛固定 10～20min。 |
|
2、自来水冲洗 2 次，每次 2min。 |
|
3、蒸馏水冲洗 2 次，每次 2min。 |
|
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。 |
染色结果：
|
细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。 |
注意事项：
|
1、切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。 |
|
2、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够，以便彻底清洗酸。 |
|
3、蓝化液常使用 0.2～1%氨水或 Scott 促蓝液或 0.1～1%碳酸锂溶液。 |
|
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
有限期：24个月有效。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
