SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 - CAS号查询_生物试剂_化学试剂_分析试剂

中文名称:	SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒
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PS0149 SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 (psaitong)

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产品简介：

聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis， SDS-PAGE)，其原理在于聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)；非变性聚丙烯酰胺凝胶蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开，主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。 SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒把所需的缓冲液、SDS等预混于下层胶缓冲液(4×)(用于配制分离胶)和上层胶缓冲液(4×)(用于配制浓缩胶)，分别含有Tris-HCl(pH8.8)、SDS和Tris-HCl(pH6.8)、SDS，具体配制的量应根据器具大小决定。

操作步骤：

1、配制10%过硫酸铵：直接在Ammonium Persulfate中加入蒸馏水，充分溶解，分装成小份储存于-20℃或4℃。注意：一般用1.5mlEP管分装成0.5-1ml每支，-20 ℃保存，每支使用2-3次即弃用。短期使用时，可保存于4℃，1 周有效。
2、根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，按照下表配制分离胶(下层胶)：

SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
6%胶	50-150kD
8%胶	30-90kD
10%胶	20-80kD
12%胶	12-60kD
15%胶	10-40kD

成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）
6%胶	5	10	15	20	30	50
蒸馏水	2.7	5.4	8.1	10.8	16.2	27
30% Acr-Bis (29:1)	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0
1.5M Tris-HCl(pH8.8)	1.25	2.5	3.75	5.0	7.5	12.5
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
TEMED	0.004	0.008	0.012	0.016	0.024	0.04
成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）
8%胶	5	10	15	20	30	50
蒸馏水	2.4	4.7	7.1	9.5	14.2	23.7
30% Acr-Bis (29:1)	1.3	2.7	4.0	5.3	8.0	13.3
1.5M Tris-HCl(pH8.8)	1.25	2.5	3.75	5.0	7.5	12.5
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
TEMED	0.003	0.006	0.009	0.012	0.018	0.03
成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）
10%胶	5	10	15	20	30	50
蒸馏水	2.0	4.1	6.1	8.1	12.2	20.3
30% Acr-Bis (29:1)	1.7	3.3	5.0	6.7	10.0	16.7
1.5M Tris-HCl(pH8.8)	1.25	2.5	3.75	5.0	7.5	12.5
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.012	0.02
成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）
12%胶	5	10	15	20	30	50
蒸馏水	1.7	3.4	5.1	6.8	10.2	17
30% Acr-Bis (29:1)	2.0	4.0	6.0	8.0	12.0	20.0
1.5M Tris-HCl(pH8.8)	1.25	2.5	3.75	5.0	7.5	12.5
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.012	0.02
成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）
15%胶	5	10	15	20	30	50
蒸馏水	1.2	2.4	3.6	4.8	7.2	12.0
30% Acr-Bis (29:1)	2.5	5.0	7.5	10.0	15.0	25
1.5M Tris-HCl(pH8.8)	1.25	2.5	3.75	5.0	7.5	12.5
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.012	0.02

按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶（也称堆积胶/积层胶或上层胶）：

成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）
5%胶	1	2	3	4	6	8	10
蒸馏水	0.68	1.4	2.1	2.7	4.1	5.5	6.8
30% Acr-Bis (29:1)	0.17	0.33	0.5	0.67	1.0	1.3	1.7
1.5M Tris-HCl(pH6.8)	0.13	0.25	0.38	0.5	0.75	1.0	1.25

组分：

产品名称	规格30T	Storage
试剂(A):30% Acr-Bis (29:1)	100ml	4℃避光
试剂(A):30% Acr-Bis (29:1)	100ml	4℃避光
试剂(B):下层胶缓冲液(4X)	70ml	RT
试剂(C):上层胶缓冲液(4X)	30ml	RT
试剂(D):Ammonium persulfate (过硫酸铵)	0.5g	RT
试剂(E):TEMED	1ml	4℃避光

注意事项：

1、过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效避免失效的方法是分成小份，-20℃保存，用2~3次，剩余的弃用，亦可4℃保存几天。
2、 TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3、配制聚丙烯凝胶的过程中，如果室温较低，可以置于37℃放置，加速凝固。
4、 30%Acr-Bis(29:1)有轻微神经毒性，请小心操作。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

4℃,避光,12个月

UN码：

HazardClass：

危害声明：

安全说明：

搜索质检报告(COA)

参考文献 & 客户发表文献