产品简介：
多种成分均可以从细胞中提取总蛋白，如Triton、SDS、NP-40等。NP-40裂解液 (NP-40 Lysis Buffer)是采用一种温和的裂解方法获得总蛋白的裂解液。NP-40 Lysis Buffer主要由Tris-HCl、NaCl、NP-40以及sodium pyropho-sphate， β-glycerophosphate，sodium fluoride, EDTA等多种蛋白酶抑制剂组成。用NP-40 Lysis Buffer得到的蛋白，可以用BCA蛋白定量试剂盒和Bradford蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
操作步骤：
(一)贴壁培养细胞
1、 取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。
2、 去除贴壁细胞的培养液，低速离心，弃上清。
3、 按照6孔板每孔加入150～250μl含有PMSF的裂解液的比例，加入NP-40 Lysis Buffer 。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或4℃裂解15～30min。
4、 4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、 取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。低速离心悬浮 细胞，弃上清，收集沉淀。
2、 用手指轻弹细胞，使其松散。按照6孔板每孔细胞加入150～200μl含有PMSF的裂 解液的比例，加入NP-40 Lysis Buffer 。
3、 4℃离心5～10min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
4、 进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三)组织样本
1、 取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。把组织剪切成 细小的碎片，越小越好。
2、 取在液氮或超低温冰箱中冷冻30min以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制在之内，以减少蛋白的降解。
3、 按照每20mg组织加入150～250μl裂解液的比例加入含有PMSF的裂解液。冰上或 4℃裂解。
4、 4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
1、 取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。
2、 去除贴壁细胞的培养液，低速离心，弃上清。
3、 按照6孔板每孔加入150～250μl含有PMSF的裂解液的比例，加入NP-40 Lysis Buffer 。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或4℃裂解15～30min。
4、 4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、 取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。低速离心悬浮 细胞，弃上清，收集沉淀。
2、 用手指轻弹细胞，使其松散。按照6孔板每孔细胞加入150～200μl含有PMSF的裂 解液的比例，加入NP-40 Lysis Buffer 。
3、 4℃离心5～10min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
4、 进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三)组织样本
1、 取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。把组织剪切成 细小的碎片，越小越好。
2、 取在液氮或超低温冰箱中冷冻30min以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制在之内，以减少蛋白的降解。
3、 按照每20mg组织加入150～250μl裂解液的比例加入含有PMSF的裂解液。冰上或 4℃裂解。
4、 4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
组分：
| 产品名称 | 规格 | Storage |
| NP-40 Lysis Buffer | 100ml | -20℃ |
注意事项：
1、 在贴壁培养细胞的操作步骤中，去除贴壁细胞的培养液后，如果血清中的蛋白没有干扰， 可以不用清洗。
2、 如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减 少裂解液的用量。
3、 在培养细胞的裂解中，如果细胞量较多，必需分装成50～100万细胞/离心管，然后再 裂解。
4、 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈Vortex 使样品裂解充分。
5、 溶解NP-40 Lysis Buffer时，应尽量缩短溶解时间，避免裂解液中的有效成 分失效。
6、 细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或4℃进行。
7、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、 如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减 少裂解液的用量。
3、 在培养细胞的裂解中，如果细胞量较多，必需分装成50～100万细胞/离心管，然后再 裂解。
4、 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈Vortex 使样品裂解充分。
5、 溶解NP-40 Lysis Buffer时，应尽量缩短溶解时间，避免裂解液中的有效成 分失效。
6、 细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或4℃进行。
7、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件：
-20℃,12个月
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
