中文名称: TritonX-100细胞裂解液
英文名称:
CAS No:
分子式:
分子量:
PS0115 TritonX-100细胞裂解液 (psaitong)
产品简介:
Triton X-100 细胞裂解液是一种经典的快速裂解细胞组织并获得蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于 PAGE 电泳,Western,免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。Triton X-100、NaCl、Tris-HCl 等组成,并含有多种蛋白酶抑制剂成分,可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。作用原理是利用去污剂Triton X-100 破坏脂质双分子层,溶解胞质和细胞膜,破坏分子间微弱结合键的大部分蛋白质抗原。丌宜用 Bradford 法测定由 Triton X-100 Lysis Buffer 获得样本的蛋白浓度。
操作步骤:
(一)贴壁培养细胞
1、取 Triton X-100 Lysis Buffer 室温溶解混匀,使 PMSF 终浓度为 1mM。
2、去培养液,低速离心,弃上清。
3、按照 6 孔板每孔加入 150~250μl 含有 PMSF 的裂解液的比例加入 Triton X-100 LysisBuffer。移液器轻轻吹打,使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或 4℃裂解,通常裂解液作用于细胞 1~3s 内,细胞就会被裂解。(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
4、进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、取 Triton X-100 Lysis Buffer 室温溶解混匀,加入 PMSF,使 PMSF 终浓度为 1mM。
2、低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。
3、用手指轻弹细胞,使其松散。按照 6 孔板每孔细胞加入 150~250μl 含有 PMSF 的裂解液的比例,加入Triton X-100 Lysis Buffer
4、4℃离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
5、进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三)组织样本
1、取 Triton X-100 Lysis Buffer 室温溶解混匀后,加入 PMSF,使 PMSF 终浓度为 1mM。
2、把组织剪切成细小的碎片,越小越好。
3、取在液氮或超低温冰箱中冷冻以上的组织,迅速用液氮研磨,研磨过程尽量控制在 1~2min 之内,以减少蛋白的降解。
4、按照每 20mg 组织加入 150~250μl 裂解液的比例加入含有 PMSF 的裂解液。冰上或 4℃裂解。
5、步骤 3、4 亦可以采用如下过程:按照每 20mg 组织加入 150~250μl 裂解液的比例加入含有 PMSF 的 Triton X-100 Lysis Buffer。用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆,直至充分裂解,该过程尽量控制在 1~2min 之内,以减少蛋白的降解。
6、离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
7、进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
组分:
产品名称 规格 Storage
TritonX-100细胞裂解液 100ml -20℃
PMSF(100mM) 1.5ml -20℃
注意事项:
1、去除贴壁细胞的培养液后,如果血清中的蛋白没有干扰,可以丌用清洗。
2、如果裂解丌充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
3、如果细胞量较多,必需分装成 50~100 万细胞/离心管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
4、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 Vortex使样品裂解充分
5、裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。
6、细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或 4℃进行。
保存条件:
-20℃,12个月
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):