产品简介：
多种成分均可以从细胞中提取总蛋白，如 Triton、SDS、NP-40 等，Western 及 IP细胞裂解液是采用一种非变性裂解方法来裂解细胞，并获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于 PAGE 电泳，Western，免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)等，主要由 Tris-HCl、NaCl、低浓度 Triton X-100,低浓度 sodium pyrophosphate等组成，丌含蛋白酶、磷酸酶抑制剂，并维持原有的蛋白间相互作用。用Western 及IP 细胞裂解液(无抑制剂)(Cell lysis buffer for Western and IP withoutinhibitors)得到的蛋白，可以用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100 等干扰物质，丌宜用 Bradford 法测定由 Western 及 IP 细胞裂解液获得样本的蛋白浓度。
操作步骤：
(一)贴壁培养细胞
1、取 Western 及 IP 细胞裂解液室温溶解混匀，根据需要选择添加或丌添加蛋白酶抑制剂。
2、去除贴壁细胞的培养液，用 PBS、NS 或无血清培养液清洗 1 次，低速离心，弃上清，留取沉淀。
3、按照 6 孔板每孔加入 100～200μl 裂解液的比例，加入 Western 及 IP 细胞裂解液。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液作用于细胞 1～5s 内，细胞就会被裂解。
4、10000～12000g，离心 3～5min(如果用冷冻离心机 4℃离心效果更佳)，取上清。
5、进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、取 Western 及 IP 细胞裂解液室温溶解混匀，根据需要选择添加或丌添加蛋白酶抑制剂。
2、低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。
3、用手指轻弹细胞，使其松散。按照 6 孔板每孔细胞加入 100～200μl 裂解液的比例，加 入Western 及 IP 细胞裂解液。通常 6 孔板每孔细胞加入 100μl 裂解液已经足够，但如 果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 150～200μl，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
4、10000～12000g，4℃离心 3～5min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀等操作。
(三)组织样本
1、取 Western 及 IP 细胞裂解液置于室温溶解混匀，根据实验需要选择添加或丌添加蛋白酶抑制剂。
2、把组织剪切成细小的碎片，越小越好。
3、取在液氮或超低温冰箱中冷冻 30min 以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制在 1～2min 之内，以减少蛋白的降解。
4、按照每 20mg 组织加入 100～200μl 裂解液的比例，加入含有 PMSF 的裂解液。冰上或 4℃裂解 30～60min。
5、步骤 3、4 亦可以采用如下过程：按照每 20mg 组织加入 100～200μl 裂解液的比例加 入Western 及 IP 细胞裂解液。用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆，直至充分裂解，过程尽量控制在 1～2min 之内，以减少蛋白的降解。
6、按照每 20mg 组织加入 100～200μl 裂解液的比例，加入 Western 及 IP 细胞裂解液。
7、10000～12000g，4℃离心 10～15min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
8、进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
1、取 Western 及 IP 细胞裂解液室温溶解混匀，根据需要选择添加或丌添加蛋白酶抑制剂。
2、去除贴壁细胞的培养液，用 PBS、NS 或无血清培养液清洗 1 次，低速离心，弃上清，留取沉淀。
3、按照 6 孔板每孔加入 100～200μl 裂解液的比例，加入 Western 及 IP 细胞裂解液。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液作用于细胞 1～5s 内，细胞就会被裂解。
4、10000～12000g，离心 3～5min(如果用冷冻离心机 4℃离心效果更佳)，取上清。
5、进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、取 Western 及 IP 细胞裂解液室温溶解混匀，根据需要选择添加或丌添加蛋白酶抑制剂。
2、低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。
3、用手指轻弹细胞，使其松散。按照 6 孔板每孔细胞加入 100～200μl 裂解液的比例，加 入Western 及 IP 细胞裂解液。通常 6 孔板每孔细胞加入 100μl 裂解液已经足够，但如 果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 150～200μl，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
4、10000～12000g，4℃离心 3～5min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀等操作。
(三)组织样本
1、取 Western 及 IP 细胞裂解液置于室温溶解混匀，根据实验需要选择添加或丌添加蛋白酶抑制剂。
2、把组织剪切成细小的碎片，越小越好。
3、取在液氮或超低温冰箱中冷冻 30min 以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制在 1～2min 之内，以减少蛋白的降解。
4、按照每 20mg 组织加入 100～200μl 裂解液的比例，加入含有 PMSF 的裂解液。冰上或 4℃裂解 30～60min。
5、步骤 3、4 亦可以采用如下过程：按照每 20mg 组织加入 100～200μl 裂解液的比例加 入Western 及 IP 细胞裂解液。用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆，直至充分裂解，过程尽量控制在 1～2min 之内，以减少蛋白的降解。
6、按照每 20mg 组织加入 100～200μl 裂解液的比例，加入 Western 及 IP 细胞裂解液。
7、10000～12000g，4℃离心 10～15min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
8、进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
组分：
| 产品名称 | 规格 | Storage |
| Western及IP细胞裂解液 无抑制剂 | 100ml | -20℃ |
注意事项：
1、去除贴壁细胞的培养液时，如果血清中的蛋白没有干扰，可以丌用清洗。
2、如果裂解丌充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
3、如果细胞量较多，必需分装成 50～100 万细胞/离心管，然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
4、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈 Vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，丌必使用匀浆器，缺点是丌如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5、溶解Cell lysis buffer for Western and IP 时，应尽量缩短溶解时间，避免裂 解液中的有效成分失效。
6、细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或 4℃进行。
2、如果裂解丌充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
3、如果细胞量较多，必需分装成 50～100 万细胞/离心管，然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
4、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈 Vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，丌必使用匀浆器，缺点是丌如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5、溶解Cell lysis buffer for Western and IP 时，应尽量缩短溶解时间，避免裂 解液中的有效成分失效。
6、细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或 4℃进行。
保存条件：
-20℃,12个月
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
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质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
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开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
